„ Złoty standard ”neutralizowania wykrywania przeciwciał w Zestawy

1. "złoty standard" dla zestawu do szybkiego wykrywania przeciwciał neutralizujących

Wykrywanie przeciwciał neutralizujących jest jednym z ważnych wskaźników w procesie opracowywania szczepionki i oceny klinicznej. Złotym standardem laboratoryjnym wykrywania przeciwciał neutralizujących jest test hamowania infekcji, który obejmuje głównie test neutralizacji płytki nazębnej przy użyciu żywego ciała oraz test neutralizacji komórek śladowych do analizy poprzez wykrywanie zmiennych cytopatycznych.

Obie te dwie metody wykorzystują ilościowe żywe i różne rozcieńczenia równej ilości surowicy do zaszczepienia wstępnie przygotowanych komórek jednowarstwowych i oceny stopnia patologii komórek komórkowych i neutralizowania ciał za pomocą różnych wskaźników. Testy neutralizacji z wykorzystaniem żywych kultur in vitro odzwierciedlają miana całkowitych przeciwciał neutralizujących zdolnych do blokowania infekcji w próbkach krwi ludzkiej.

2. Standaryzacja metod wykrywania zestawów do neutralizacji przeciwciał

Metody wykrywania przeciwciał neutralizujących muszą przejść przez ścisły proces standaryzacji i odpowiednią ocenę wydajności oraz określić niski poziom ochrony poprzez ustalenie odpowiedniej wartości odcięcia w celu ustalenia korelacji z mocą ochronną. Na przykład stosunkowo dojrzała szczepionka przeciw grypie, szczepionka EV71, szczepionka przeciwko wściekliźnie, szczepionka przeciwko polio itp. Ustanowili znormalizowane testy przeciwciał neutralizujących uznane przez WHO, i mają odpowiednie standardowe produkty WHO i zalecane standardowe szczepy. Ustawiona jest wyraźna wartość odcięcia. W przypadku innych szczepionek, nawet jeśli nie ma uznanej na całym świecie metody referencyjnej, każdy producent szczepionki musi ustanowić stosunkowo znormalizowaną metodę badania przeciwciał neutralizujących.

Ponadto w przypadku pojawiających się ciężkich chorób zakaźnych, ze względu na ograniczenie źródła żywych szczepów i potrzebę działania w laboratoriach wysokiego poziomu bezpieczeństwa biologicznego, coraz więcej laboratoriów zaczęło opracowywać metody hodowli pseudokomórkowej do wykrywania przeciwciał neutralizujących. Struktura białka pseudomembranowego w metodzie jest podobna do struktury żywego ciała i nie wymaga laboratorium bezpieczeństwa biologicznego na wysokim poziomie. Operacja jest prosta, a wyniki są oceniane obiektywnie. Jednak metoda ta musi również zostać znormalizowana i powinna zostać zweryfikowana za pomocą metody żywej kultury.

Eksperci powszechnie uważają, że powyższe testy PRNT, CPE i pseudo-neutralizacji są trzema powszechnie stosowanymi i klasycznymi metodami wykrywania przeciwciał neutralizujących w ocenie szczepionek. Metodologicznie rozsądny, ale wymaga rygorystycznego procesu standaryzacji.

W odpowiedzi wiele krajowych i zagranicznych instytucji badawczych i firm produkcyjnych pracuje nad żywymi lub fałszywymi metodami wykrywania przeciwciał neutralizujących, w tym laboratoriami WHO. Jednak ze względu na ograniczony okres opracowywania szczepionek odpowiednie badania podstawowe są nadal niewystarczające. W połączeniu z ciągłym pojawieniem się zmutowanych szczepów, do tej pory nie ustalono standaryzowanych metod testowania przeciwciał neutralizujących; istnieją również znaczne różnice między metodami testowymi ustalonymi przez różne instytucje.